新冠疫苗保護(hù)性能評(píng)估

采用膠體金免疫層析技術(shù)，通過(guò)雙抗原夾心法測(cè)試RBD結(jié)合抗體：取接種疫苗后的血清滴在試紙條加樣區(qū)，血清會(huì)在毛細(xì)作用下向前層析，結(jié)合墊上的膠體金會(huì)溶解，然后和血清一起向前移動(dòng)。血清到達(dá)檢測(cè)區(qū)后，膠體金標(biāo)記的S-RBD、血清中的抗體與檢測(cè)線上包被的S-RBD形成復(fù)合物，表現(xiàn)為檢測(cè)線顯色，血清中的抗體含量與檢測(cè)線顯色強(qiáng)度成正相關(guān)。反應(yīng)結(jié)束后，直接肉眼觀察顯色情況或采用膠體金檢測(cè)儀進(jìn)行測(cè)試。通過(guò)檢測(cè)線和質(zhì)控線上膠體金顯色強(qiáng)弱，可判斷RBD抗體的含量。該方法可檢測(cè)血清、血漿及其他分泌物中含有可與RBD相互作用的任何抗體，并且此方法不受樣本種屬及抗體型別的限制。

膠體金免疫層析檢測(cè)RBD結(jié)合抗體

應(yīng)用場(chǎng)景

血清中RBD抗體篩查、早期患者血清學(xué)診斷及疫苗臨床效果評(píng)價(jià)—抗RBD總抗體檢測(cè)。

測(cè)試結(jié)果

標(biāo)記: 膠體金標(biāo)記S-RBD (bs-46003P)和膠體金標(biāo)記兔IgG (bs-0295P)包被: C線為羊抗兔IgG (bs-0295G)，T線為S-RBD (bs-46003P/bs-46005P)

備注：“+++”表示反應(yīng)很強(qiáng)；“++”表示反應(yīng)較強(qiáng)；“+”表示反應(yīng)較弱；“±”反應(yīng)很弱；“-”表示無(wú)反應(yīng)。

采用膠體金免疫層析法的競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)試RBD中和抗體：取接種疫苗后的血清滴在試紙條加樣區(qū)，血清會(huì)在毛細(xì)作用下向前層析，結(jié)合墊上的膠體金會(huì)溶解，然后和血清一起向前移動(dòng)。血清到達(dá)檢測(cè)區(qū)后，膠體金標(biāo)記的S-RBD與檢測(cè)線上包被的ACE2結(jié)合，并被固定在檢測(cè)線上，表現(xiàn)為檢測(cè)線顯色，而血清中的中和抗體會(huì)與檢測(cè)線上的ACE2競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合S-RBD，從而導(dǎo)致固定在檢測(cè)線上的S-RBD減少，檢測(cè)線顯色下降。反應(yīng)結(jié)束后，直接肉眼觀察顯色情況或采用膠體金檢測(cè)儀進(jìn)行測(cè)試。通過(guò)檢測(cè)線和質(zhì)控線上膠體金顯色強(qiáng)弱，可判斷中和抗體抑制效果。該方法可檢測(cè)血清、血漿中可阻斷RBD-ACE2相互作用的任何抗體，并且此方法不受樣本種屬及抗體型別的限制。

膠體金免疫層析檢測(cè)RBD中和抗體

應(yīng)用場(chǎng)景

疫苗臨床效果評(píng)價(jià)、康復(fù)者血清中保護(hù)性抗體水平檢測(cè)—模擬病毒侵襲細(xì)胞過(guò)程，通過(guò)阻斷RBD與ACE2的結(jié)合間接評(píng)價(jià)機(jī)體內(nèi)抗RBD中和性抗體的水平。

測(cè)試結(jié)果

標(biāo)記: 膠體金標(biāo)記RBD (bs-46003P)和膠體金標(biāo)記兔IgG (bs-0295P)包被: C線為羊抗兔IgG (bs-0295G)，T線為Human ACE2 (bs-46001P/bs-46002P)

由此可見，陰性血清無(wú)中和活性，而陽(yáng)性血清中含有中和性抗體，血清稀釋倍數(shù)在1:200時(shí)可完全阻斷RBD與ACE2的結(jié)合。

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